Recuento de leucocitos

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO industrial y de servicios No 199

Marisol Sebastián Rendón

Laboratorista Clínico

4 "DM" 

Practica No 5

Recuento de leucocitos  

"Realizar Biometría Hemática"

Dr. Vicente Martínez Fragoso

 

Objetivo: aprender a realizar y aplicar la metodología para determinar el número de leucocitos por mm3 y saber contarlos correctamente

 

Fundamento:

 

Los leucocitos por su morfología se clasifican en: Polimorfos nucleares o granulocitos y los mononucleares.

los polimorfonucleares son: Los Basófilos, Neutrófilos y Eosinófilos, y los Mononucleares son: los Linfocitos y Monocitos.

Las principales funciones de los globulos blancos es la Fagocitosis, la defensa inmunológica específica o inespecífica.

 El recuento leucocitario representa el número de leucocitos en un litro de sangre completa. La fórmula leucocitaria tiene por objetivo determinar los porcentajes de las distintas clases de leucocitos normales y anormales en la sangre. A partir de los porcentajes puede incluso calcularse el número real de cada clase de leucocitos por mm3 de sangre (valor absoluto), conociéndose el total de leucocitos.

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El diluyente que más se utiliza es el de Turk, el cual contiene ácido acético en una concentración hipertónica, esto provoca la destrucción de los eritrocitos, pero, no de los leucocitos, el diluyente contiene además unas gotas de violeta de genciana o azul de metileno, porque así nos permite reconocer más fácilmente a los leucocitos, ya que tiñen ligeramente su núcleo, permitiendo observarlos más fácilmente.

 La sangre anticoagulada se deposita en un líquido que permite evidenciar los leucocitos, manteniéndolos visibles, mientras que los eritrocitos son hemolizados. El recuento del número de leucocitos o glóbulos blancos se expresa por mm3 (milímetro cúbico).

Material:

- Pipeta de thoma para globulos blancos

- Equipo para venopunción

- boquilla blanca

- tubos de ensayo

- papel parafilm

- camara de neubauer

- gasas

- cubrehematimetro

- gasas

- microscopio

- papel absorbente

sustancias:

- solucion turk al 1%

Procedimiento:

1.-Una vez obtenida la sangre con anticoagulante se procede a aspirar la sangre con la pipeta de glóbulos blancos hasta la marca de 0,5 y  limpiar la punta con papel absorbente.

 2.-Introducir la pipeta en el tubo que contenga solución de Turk y absorber hasta la marca de 11 (no debe haber burbujas), para que obtengamos una dilución de 1:20 

3.-Tapar ambos extremos con el papel parafilm y mezclar manualmente o en un rotador automático por 2 ó 3 minutos.

4.- colocar la laminilla de vidrio en la cámara de neubauer para que debe estar limpia y seca.

 5.-Agitar la pipeta y descartar las cuatro primeras gotas para luego colocar una gota pequeña de esta solución en la cámara para que se llene por capilaridad 

 6.-Deje reposar 3 minutos para que los leucocitos se sedimenten.

 7.-Enfocar con objetivo de 10x y contar en 4 cuadrados grandes angulares

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Observaciones:

En esta imagen no se aprecia muy bien los cuadros pero esta enfocado en uno de los cuadros laterales donde se tienen que contar los leucocitos y para realizar la lectura se deben contar todos los leucocitos que se encuentren adheridos en la línea horizontal superior y vertical exterior, o de lo contrario, todos los leucocitos, adheridos a la línea horizontal inferior y vertical interior.

Resultados:

Leucocitos contados en 4 campos

Nº de leucocitos x mm³ = altura x dilución x área

Leucocitos contados en 4 campos Reemplazando = 1/10 x 1/20 x 4

Leucocitos contados en 4 campos = 4/200 = 1/50

Nº de leucocitos x mm³ = Nº leucocitos contados x 50

4/200

Valores de referencia:

Leucocitos:

-Adultos: 5000 - 10 000 / mm3

- Recién nacidos: 10 000 - 25 000 / mm3

-Niños: 8000 - 15 000

Nosostros contamos en total 110 y al multipliralo por 50 dio como resultado  5500/mm3

y por los valores de referencia esta dentro del indice normal ya que nuestro paciente tenia 16 años de edad

conclusión:

El procedimiento del recuento de eritrocitos es parecido al del conteo de leucocitos pero en este caso se utiliza una pipeta de thoma para globulos blancos y pues donde se hace la dilución es mas pequeña ya que tenemos menos leucocitos que eritrocitos y ahora la dilución sera de 1:20, tambien utilizamos otra sustancia que fue la de turk que es la mas utilizada por que esta conformada por ácido acético en una conentración hipertónica la cual produce la destrucción de los eritrocitos pero no de los leucocitos, tambien tiene unas gotas de azul de metileno para que puedamos observar con mejor clarida los leucocitos ya que tiñe ligeramente su núcleo, otra diferencia es los cuadrantes donde se realiza la lectura de estos que es en los cuatro cuadros angulares como se muestra en esta figura

Bibliografias:

http://html.rincondelvago.com/manual-de-hematologia.html consultado el 1 de abril del 2012

• Martínez Fragoso, Vicente. Manual de Biometría Hemática.CBTis199, México, 2012. Pp. 22-24 consulatado el 2 de abril del 2012

http://es.scribd.com/doc/3246166/practicas-de-hematologia consulatdo el 2 de abril del 2012