sábado, 1 de octubre de 2011

Técnica de Stoll


S.E.M.S                                                                 DGETI


Centro de Bachillerato Tecnológico Industrial Y de servicios No. 199


Marisol Sebastián Rendón


Laboratorista clínico

3 “DM”

Practica: Técnica de stoll

Dr. Vicente Martínez Fragoso

Fecha de realización: 30 de septiembre del 2011

Introducción:
Esta técnica fue ideada y desarrollada por Stoll en 1923.Este método forma parte de los exámenes considerados cuantitativos, por lo que es necesario tener el antecedente de que la muestra se encuentra positiva, para su posterior cuantificación
.
La técnica es de utilidad para hacer una evaluación de la intensidad de ciertas helmintiasis, se debe recordar que los helmintos son metazoarios y dentro de esta clasificación se encuentran los nematelmintos gusanos redondos tales como;
·         Ascaris lumbricoides
·         Trichuris trichiura
·         Uncinaris( Necator Americanus y Ancylostoma duodenale)
·         Strongyloides stercoralis

Además también se pueden cuantificar platelmintos (gusanos planos) como:
·         Hymenolepis nana
·         Hymenolepis diminuta
·         Otras teniasis

Después de identificar una parasito, puede ser necesario determinar la intensidad de la infestación. Por lo general, la sintomatología de las enfermedades parasitarias se correlaciona con el número de parásitos presentes. Se conoce la eliminación diaria de huevecillos de varias especies de helmintos. Por tanto, se hace una estimación del número de parásitos al contar el numero de huevos en una cantidad conocida de heces y al calcular el numero de gusanos que requieren para producir dicho numero. Sobre los resultados tienen influencia muchas variables, como dieta, mala digestión, los ciclos de producción de huevos y la consistencia de las heces. Pero las cuentas que se realizan antes y durante el tratamiento, permiten guiarlo y las realizadas después servirán como referencia para el existo de el mismo. Los mejores resultados se logran cuando las cuentas se realizan en muestras sucesivas obtenidas en un periodo de varios días, de manera que se pueda determinar el promedio diario de liberación de huevos
 
Fundamento:
Es básicamente aritmético, los cálculos se basan en las diluciones empleadas. Debido a que la cantidad de muestra es muy pequeña  en comparación con el volumen de hidróxido de sodio, las helmintiosis moderadas son más difíciles de evaluar. Por el hecho de no utilizar tinción temporal y debido a que los quistes se aclaran con el hidróxido es una técnica específica para la cuantificación de helmintiasis






Material:                                          sustancias
v  Probeta graduada                                           - hidróxido de sodio 0.1 N
v  Palillo aplicador
v  Cuantas de vidrio
v  Microscopio
v  Tubo de ensaye cónico

Procedimiento:
1)    En el tubo de ensaye cónico se le pone 5.6 ml de hidróxido de sodio 0.1 N y con un palillo aplicador se agrega la materia fecal hasta elevar el nivel liquido a 6 ml

2)   Se añaden 5 cuantas de vidrio, se tapa con firmeza y se agita hasta formar una suspensión homogénea durante un minuto y después rápidamente se toman 0.075 ml de la suspensión y se coloca en el portaobjetos posteriormente poniéndole un cubreobjetos
3)    Con el obejtivo de 40X se cuentan los huevos de toda la preparación

4)    Se efectua dos cuentas utilizando partes separadas de alicotas de 0.075 ml de la suspensión (totla=0.15 ml) 
Cálculo:
1.- La dilución fecal original es de 1 en 15 (4ml/60ml). Como se contaron los huevos en un volumen total de 0.15 ml, el numero total de estos en 1 ml se encuentran al multiplicar la cuenta total por 100 (1/5x0.15x100=1)
2.- Suponiendo que el promedio de una persona rebasa los 100 g de heces por día, es posible calcular el numero d huevos por día multiplicándolo el resultado por 100 (o la cuenta de la suspensión original por 10000)
3.- para determinar el numero de parásitos hembras presentes, se divide el numero diario de huevecillos que hay en las heces entre el número promedio de
Hembra de la especie Necator: 7000 huevos/día
Hembra de la especie Ascaris: 200000 huevos/día
Hembra de la especie Trichuiris: 7500 huevos/día
4.- Se encuentra la cantidad total de parásitos al multiplicar por dos resultados encontrados en el paso tres, ya que se supone que en cualquier infestación hay un parasito macho por cada parasito hembra
5.- Algunos técnicos creen que se deben utilizar los factores de correlación de la consistencia de las heces para obtener resultados mas exactos. Para esto, se debe multiplicar el número que se obtiene en el lapso uno por el factor apropiado. Heces formadas=1, blandas formadas=1.5, blandas diarreicas=3, fluidas duarreicas=4, muy liquidas=5

Observaciones:
en esta imágenen se puede observar una fibra vegetal y un huevo esférico   
También aqui se observar un huevo semiesférico 
Conclusión:
Esta práctica es diferente a las que hemos hecho ya que ahora es cuantitativa ya que nos permite saber el número de huevos por gramo o mililitros de heces en una muestra dada, permite calcular el número de parásitos adultos presentes en el intestino dando así una cifra aproximada que permite clasificar las infecciones en ligeras, moderadas e intensas. Se basa en los principios de dilución y sapoficaciòn ya que el hidróxido de sodio al ponerse en contacto con las grasas de la materia fecal la saponifica haciendo que los huevos de los helmintos sean menos pegajosos y pues la técnica de flotación y sedimentación son poco fiables para el recuento de huevos por ello siento que este método es mas seguro, también sencillo de hacer

 Fuentes de información: