Método de concentración por sedimentación RITCHIE
Fundamento: Se basa en la concentración de los quistes y huevos por sedimentación mediante la centrifugación, con la ayuda de formol y éter para separar y visualizar los elementos parasitarios.
Unas ventajas que tiene este método es concentrar y no deformar las formas parasitarias, permite el transporte y almacenamiento de la materia fecal procesada antes de ser examinada, se usa cuando se necesita una técnica para evaluación de tratamiento y determinación de frecuencia
Introducción:
En 1917 Carles y Barthelemy describieron el primer método de concentración por sedimentación utilizando solución salina, éter y formaldehido, años más tarde, en 1948 Ritchie describió un método semejante, el cual hasta la fecha se sigue utilizando. En evaluaciones comparativas con este método, se ha demostrado su utilidad para el diagnóstico de parasitosis intestinales leves o moderadas.
La sedimentación de parásitos intestinales en heces se logra por la centrifugación ligera o por gravedad de materia fecal logrando la recuperación de todos los protozoarios, huevos y larvas, especialmente huevos de trematodos. Aunque se inactivan las formas móviles de los protozoarios, se mantiene la integridad de los organismos. Es efectivo en heces con cantidades excesivas de grasa. Sin embargo, durante la sedimentación aparte de concentrarse los parásitos se quedan reunidos también algunos otros materiales.
Es un método de concentración fecal muy parecido al de faust, la única diferencia es que en esta técnica se sedimentara en el fondo la materia fecal al examinar y es útil para encontrar quistes, huevecillos y trofozoitos muy pesados
Material y equipo:
Centrifuga soluc. Salina isotonica
Tubos de ensaye conicos de 15 ml soluc. De formaldehido al 10%
Gasa coratda en cuadros éter
Embudos
Vaso precipitado de 50 ml
Aplicadores de madera
Pipetas Pasteur con bulbo
Portaobjetos
Cubreobjetos
Microscopio
Método:
1) Se coloca con la ayuda del aplicador de madera la materia fecal en el vaso de precipitado y se añaden 10 ml de solución salina y se homogeniza
2) después se filtra la suspensión con el embudo colocándole la gasa y se recoge el filtrado en el tubo cónico
3) luego se centrifuga la suspensión a 2000 rpm por 2 min
4) después se decanta el sobrenadante y se resuspende el sedimento con solución salina, centrifugando, decantando y resuspendiendo 2 veces mas
5) luego al ultimo sedimento se agregan 5 ml de solución de formaldehido, se mezcla y se deja reposar durante 10 min
6) después se añaden 0.5 ml de éter, se tapan los tubos y se agitan energéticamente durante 30 segundos
7) se centrifuga durante 2 minutos a 2000 rpm
8) después de centrifugar se observan 4 capas
- éter en la superficial
-un tapon de restos fecales
-fromaldehido
- sedimento en el fondo del tubo, conteniendo los elementos parasitarios
9) se decanta el sobrenadante y se introduce la pipeta pasteur para extaer una gota del sedimento colocándola después en el portaobjetos
10) se le añade una gota de yodo lugol y se cubre con un cubreobjetos
11) se observa la preparación en el microscopio con el objetivo de 10X y 40X
Observaciones:
se observaron quistes,también identificamos bacterias, jabones, fibras musculares no digeridas
Conclusión:
El método de ritchie es muy eficaz para detectar o mas bien observar quistes y huevos, ya que tiene la ventaja de concentrar y no deformar las formas parasitarias yo creo que esto es muy cierto y es muy útil para verificar mejor los resultados obtenidos de otros métodos como es el de coproparasitoscòpico directo que no es muy seguro ya que se pude obtener falsos positivos pero e visto en internet que hay personas que no están de acuerdo en esto ya que las soluciones son muy toxicas para los seres humanos y también contaminantes para el medio ambiente y por ello han inventado otros procedimientos usando otras sustancias pero pues yo estoy de acuerdo con el método original ya que si es muy útil para dar un diagnostico de que es lo que tiene el paciente para así poder dar un tratamiento adecuado
Fuentes de información:
Muy bien. asi vamos a trabajar este semestre.
ResponderEliminarSaludos