Cuenta de eritrocitos

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO industrial y de servicios No 199

Marisol Sebastián Rendón

Laboratorista Clínico

4 "DM" 

Practica No 4

Conteo de eritrocitos

"Realizar Biometría Hemática"

Dr. Vicente Martínez Fragoso

Objetivo: saber como realizar un conteo de Eritrocitos por milímetro cúbico de sangre asi como tambien aprender a interpretar el resultado para ello necesitamos adiestrarnos en el manejo de la pipeta de thoma y la cámara de Neubauer 

Introcucción:

Es un examen de sangre que determina el numero de globulos rojos que tenemos. Los eritrocitos contienen hemoglobina, que transporta oxígeno y la cantidad de oxígeno que los tejidos corporales reciben depende de cuantos globulos rojos tengamos y de que tan bien funcionen por ello este examen nos sirve para saber si un paciente padece de anemía o policitemía  

Fundamento:

Esto se basa en dos puntos principales los cuales consisten:

* Primero el líquido de dilución pero no deve diluir solamente los eritrocitos hasta cifras legibles, si no tambien que nos permita identificarlos, tambien que destruya otros elemntos celulares que en este momento no nos interesa y los diluyentes más utilizados en el recuento de eritrocitos son el líquido de Hayem, las soluciones de Gower, de Dacie o bien simplemente solución salina de NaCl al 0.9 %

*Segeundo utilizar equipos automatizados que nos proporcionen las lecturas del número de eritrocitos por mm cubico como es la camara de Neubauer que presenta un retículo con una superficie total de 9mm2 dividida en 9 cuadros de 1mm2 los cuatro cuadros grandes de los extremos son los que usualmente se emplean para contar leucocitos. De los 9 cuadros centrales grandes el central es el único dividido en 25 cuadros y la piepta de thoma que en el interior del bulbo existe una perlita de plástico (roja), para favorecer la mezcla de la sangre con el líquido

Materiales y reactivos:

- Pipeta de Thoma para globulos rojos

- Camara de Neubauer

- Microscopio

- Diluyente de Hayem

-Papel filtro

- Equipo para venopunción para obtener sangre venosa

- Gasas

- Pepel parafin

Procedimiento:

1) Llenar la pipeta de globulos rojos con sangre hasta la marca de 0,5 para realizar una dilución de 1/200, y si se carga hasta 1, la dilución será 1/100. Limpiar la punta con gasa o papel absorbente. 

2) Limpiar la punta con gasa o papel absorbente



3) Introducir la pipeta en el tubo o frasquito conteniendo diluyente (Hayem) y llenar de líquido de dilución hasta la marca de 101.

4)  se tapa la pipeta de ambos lados con el papel parafin y se agita manualmente de 2 a 3 minutos.

5) Agitar bien la pipeta y descartar 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una gota pequeña cerca de un extremo de la cámara para que por capilaridad se llene exactamente. 

7) Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadrícula a 10x, luego con el objetivo de 40x contar sobre el cuadrado grande central de la cámara sólo en 5 cuadrados pequeños: uno central y cuatro angulares (80 cuadraditos en total). 

8) En el recuento se incluyen las células que cubren o tocan por dentro o por fuera las líneas limitantes superior e izquierda en el cuadrado pequeño de recuento y no se consideran los correspondientes a los límites inferior y derecho. Se hace el recuento en cuadricula central, las cuatro esquinas y el centro. 

Observaciones:

Aqui podemos observar la cuadricula central en donde vamos a contar los eritrocitos y va hacer en las cuatro esquinas y el centro

Resultados:

Hematíes contados en 5 cuadrados pequeños se suman.

Nº de hematíes x mm3 = altura x dilución X área 

 Nº de hematíes x mm3 = 1/10 x 1/200 x 1/5 = 1/10 000 

Nº de hematíes x mm3 = hematíes contados x 10 000

La toma de muestra fue de mujer y se contaron 489 y al multiplicarse por 10000 da un resultado 4890000/mm3 y esta dentro del rango normal de acuerdo a los valores de referencia
 Valores de referencia:

(Unidades tradicionales millones de células/mm3). 
Hombres 4 500 000 - 5 500 000 
Mujeres 4 000 000 - 5 000 000 
Niños (4 años) 4 200 000 - 5 200 000 
Lactantes (1 -6 meses) 3 800 000 - 5 200 000 
Recién nacidos 5 000 000 - 6 000 000 

Conclusión:
Esta practica nos sirvio primero para saber como realizar el conteo de eritrocitos, y que los eritrocitos son celulas son celulas de color rojo de forma biconcava que no tienen núcleo y su principal componente es la hemoglobina, y su objetivo es el transportar oxígeno hacia los diferentes tejidos del cuerpo por ello es muy importante determinar cuantos eritrocitos tenemos en la sangre por mm3 ya que con ello podemos determinar si hay anormalidades en un paciente por ejemplo:

Los números de glóbulos rojos más altos de lo normal pueden deberse a:

• Consumo de cigarrillo
• cardipatía congénita
• Deshidratación (como por ejemplo, por diarrea severa)
• Tumor renal (carcinoma de células renales)
• Niveles bajos de oxígeno en la sangre (hipoxia)
• Fibrosis pulmonar
• Policitemia

También el conteo de glóbulos rojos se incrementará durante varias semanas cuando usted se traslade a una altitud mayor.

Los números de glóbulos rojos más bajos de lo normal pueden deberse a:

• Anemia
• Insuficiencia de la médula ósea (ejemplo, por radiación, toxinas o tumor)
• Deficiencia de eritropoyetina (secundaria a enfermedad renal)
• Hemólisis (destrucción de glóbulos rojos) debido a transfusión, lesión vascular u otra causa
• Hemorragia (sangrado)
• Leucemia
• Desnutrición
• Deficiencias nutricionales de:
  • hierro
  • cobre
  • folato
  • vitamina B12
  • vitamina B6
• Sobrehidratación
• Embarazo

Tambien es importante destacar que para realizar esta practica es muy importante el líquido de dilucion ya que nos permite identificar a los eritrocitos y destruye a otras celulas, la pipeta de thoma que presenta cerca del extremo superior una marca de 101, inmediantamente continúa una dilatación (bulbo) que contiene una perla roja mezcladora, leugo sigue el tallo, el cual esta dividido en 10 partes con 2 marcas: 1 acabando el bulbo y 0.5 a la mitad del tallo y tambien otro instrumento muy inportante es la camara de neubauer la cual nos permite contar los eritrocitos por mm3 y cada instrumento tiene su importancia y caracteristica para lograr hacer este examen. Nostros para dar un resultado correcto debemos de practicar mucho porque la practica hace al maestro

Bibliografía:
http://html.rincondelvago.com/manual-de-hematologia.html consultada el 11 de marzo del 2012

http://www.buenastareas.com/ensayos/Conteo-De-Eritrocitos/857313.html consultada el 11 de marzo del 2012

Manual de parcticas de Dr. Vicente Martínez Fragoso consultado el 11 de marzo del 2012

 





Determinación de Hematocrito

S.E.M.S                                               DGETI

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO Industrial y de Servicios No. 199

PRACTICA No. 3

“DETERMINACIÓN DE HEMATOCRITO”

ALUMNA: Marisol Sebastián Rendón

“REALIZAR BIOMETRÍA HEMÁTICA”

4º DM LAB CLÍNICO

DR. VICENTE MARTÍNEZ FRAGOSO

 

Objetivo:

Saber realizar esta tecnica, conocer para que sirve y como funciona

Fundamento:

El Hematocrito es el volumen de eritrocitos expresados como un porcentaje de volumen de sangre total existente en una muestra. Se recomienda para la determinación del hematocrito utilizar sangre venosa con anticoagulante, esta determinación es importante para poder calcular los índices de Wintrobe

El Hematocrito es una medición de la proporción del volumen que ocupan los eritrocitos en el volumen total de sangre entera en una muestra de sangre

Mide la fracción que comprende a los glóbulos rojos (masa globular), respecto al volumen total de la muestra de sangre venosa o capilar. Puede expresarse en porcentaje o como valor decimal.

Hto = altura de la columna de glóbulos rojos / altura de la columna de sangre total (glóbulos rojos más plasma)

Método de tubo wintrobe

Materiales:

-Tubo de Wintrobe graduado de 0 - 100 mm.

-Pipetas Pasteur o pipetas de transferencia.

-Tapón de goma.

 -Bulbo de huele

-Centrífuga

-Sistema Vacutainer (Tubo lavanda)

Procedimiento:

1) Llenar la sangre extraída con anticoagulante con una pipeta Pasteur, comenzando desde el fondo hasta la marca superior de 100 mm, teniendo cuidado de no provocar espuma

Lectura:

Del tubo graduado se mide directamente el nivel de la columna de glóbulos rojos.

valores de referncia:

Hombres: 40% - 54%

Mujeres: 38% - 48%

La muestra de sangre era de un hombre y se obtuvo un porcentaje de 48% por lo que vemos que esta normal ya que esta dentro del rango establecido de acuerdo a los valores normales para un hombre

Método de microhematócrito

Material:

-Capilares rojos y azules (75 mm x 1,5 mm).

-Plastilina.

-Microcentrífuga

-Encendedor o cerillos.

Técnica:
1) Tomar la muestra en capilares rojos heparinizados directamente del pulpejo del dedo, o utilizar capilares azules sin heparina para sangre venosa con anticoagulante de  EDTA. Debe llenarse aproximadamente 70% - 80% del capilar

2) sellar con fuego el otro extremo donde no hay sangre

3) Colocar el capilar sobre la plataforma del cabezal de una centrífuga de microhematócrito, con el extremo ocluido adherido al reborde externo de la plataforma



4) Centrifugar por 5 minutos entre 10 000 - 12 000 rpm.



 Resultados:

Uso de la escala:

Calcular el porcentaje de eritrocitos en la muestra de sangre con la ayuda de la regleta, material utilizado que consta de un soporte y dos pequeñas tiras las cuales se colocan al nivel más alto de la muestra ya centrifugada y la otra en la división que se presenta entre los dos colores obtenidos, posteriormente se obtendra el porcentaje que marque la divicion o linea que pasa justo sobre el nivel del color rojo

Valores de referencia:

Hombres 40% - 50%

Mujeres 38% - 44%

Niños (5 años) 38% - 44%

Lactantes (3 meses) 37% - 42%

Recién nacidos 50% - 58%

Cálculos:

Otra forma de calcular el porcentaje es realizando una regla de tres para eso se considera el 100% los eritrocitos, leucocitos y plasma, antes de centrifugar se mide con una regla y despues de haber centrifugado se vuelve a medir pero solamente los eritrocitos

Ejemplo:

La muestra que utilizamos pertenece a un hombre

-Medimos el total de sangre en el tubo capilar antes de centrifugar y fue de 5.4 cm 

-Despues de centrifugar fue de 2.6 cm 

*Para ello se realizo la siguiente regla de tres:

5.4---------- 100%

2.4---------- X

Obtuvimos un porcentaje de 48.1 % de cuaerdo a los valores de referencia de un hombre esta dentro de lo normal por lo tanto no hay alguna anormalidad en el paciente

Observaciones:

Obtuvimos casi el mismo porcentaje en ambas tecnicas de macro y micro  solo salio diferente por una decima, el paciente esta dentro de los rangos normales para un hombre asi que no padece de anormalidades

Conclusiones:

El hematocrito es la medicion del volumen de globulos rojos en la sangre en porcentaje y mediante la centrifugacion separamos en tres niveles que son los eritocitos, plaqueta y luecocitos y hasta arriba el plasma, este examen nos sirve principlamente para diagnosticar algunas enfermedades como pueden ser anemias, leucemias o policitemias

Si los niveles son bajos pueden deberse a:

- Anemia

-Sangrado

- Destruccion de los globulos rojos

- Leucemia

-Desnutricion

- Sobrehidratacion

Si los niveles son altos puede deberse a:

- Cardiopatía congénita

- Deshidratacion

-Eritrocitosis

- Niveles bajos de oxigeno en la sangre

Fibrosis pulmonar

- Policitemia

 La tecnica mas facil de realizar fue la de macro hematocirto con el tubo de wintrobe ya que es mas facil dar un resultado aunque ambas tecnicas son efectivas pero en la de microhematocirto se puede hacer con dos muestras diferentes ya sea capilarmente o con la venopunción

Bibliografía:

 http://es.wikipedia.org/wiki/Hematocrito consulatdo el 4 de marzo del 2012

http://es.wikipedia.org/wiki/Hematocrito consultado el 4 de marzo del 2012

 

2) Centrifugar a 3000 rpm por 30 minutos

Punción venosa

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO industrial y de servicios No 199

Marisol Sebastián Rendón

Laboratorista Clínico

Practica No 2

"Realizar Biometría Hemática"

4 "DM"

Dr. Vicente Martínez Fragoso

Objetivo:

tomar una muestra de sangre en la parte venosa, tomando en cuenta todas la precauciones devidas, con el procedimiento correcto con el fin de aprender a realizar esta tecnica hasta hacerla de una forma adecuada para ello se necesita desribirla, experimentarla y practicarla, asi como tambien saber en que casos se necesita este tipo de muestra

Introduccion:
la punción venosa es la accion de introducir una aguja en una vena para así acceder al torrente sanguineo, de la estracción de sangre se realizan analisis los cuales pueden ser de rutina para ayudar al diagnostico de enfermedades o al contro de salud

Fundamento:

Las 2 fuentes de sangre para el estudio en el laboratorio de Hematología son la sangre venosa y la capilar, aunque es posible que se requiera sangre arterial para realizar procedimientos como el análisis de gases sanguíneos, éste procedimiento no suele realizarse en el laboratorio de hematología

Ventajas de una extracción de sangre venosa

Ø  Pueden hacerse repetidos exámenes con la misma muestra.

Ø  Parte de la muestra (plasma o suero) puede congelarse para referencia futura.

Desventajas de una extracción de sangre venosa

Ø  La punción venosa, por su largo procedimiento, requiere mayor preparación que el método capilar.

Ø  El método es técnicamente difícil en niños, individuos obesos y pacientes en shock.

Ø  La hemólisis debe ser evitada, pues se puede obtener una disminución en el recuento de eritrocitos.

Ø  Debe evitarse prolongada estasis venosa producida por el torniquete, pues produce hemólisis y otros cambios que ponen la sangre en un estado inadecuado para el análisis de gases, recuentos celulares, determinación de pH sanguíneo y algunas pruebas de coagulación.

Ø  La sangre anticoagulada si no es de obtención reciente no debe ser utilizada en extensiones de sangre, pues algunos anticoagulantes producen cambios en las plaquetas que pueden causar aglutinaciones, agregación plaquetaria y dificultan la identificación de leucocitos.

Ø  Puesto que algunos de los componentes de la sangre no son estables, los recuentos de leucocitos y plaquetas e índice de sedimentación deben realizarse antes de que pasen dos horas desde que se obtuvo la muestra.

Material:

-Algodón

- Alcohol al 70 %

- Torniquete

- jeringa de 5 ml o vacutainer

- Tubos con anticoagulante EDTA

- Tubos sin anticoagulante

- Portaobjetos

Procedimiento:

1) Verificar que los elementos por utilizar estén listos, y que el paciente se sienta cómodo.

2) Aplicar el torniquete aproximadamente cuatro dedos por encima de la flexión del codo o a 10 cm del codo, sujetar con un medio nudo.



3) realizar asepxia con una torunda hecha de algodón con alcohol al 70%

4) El paciente deberá abrir y cerrar la mano durante unos segundos y después la mantendrá cerrada, esto ayudará a visualizar las venas superficiales.

NOTA: las venas más utilizadas para la venopunción estan localizadas en el área antecubital:
vena cubital: es la más larga y gruesa
vena cefalica: es un poco menos gruesa
vena basilica: es mas pequeña que las anteriores, esta cerca de la arteria braquial por lo que su puncion es mas riesgosa y dolorosa para el paciente

5) Se coloca la aguja en dirección paralela a la vena con el bisel hacia arriba, se perfora la piel haciendo avanzar la aguja 0.5-1 cm en el tejido subcutáneo, luego se perfora la vena

 6) se coloca el tubo vacutainer y se espera a que se llene de sangre

7) Retirar el torniquete e indicar al paciente que deje de hacer fuerza con el puño, colocar un algodón seco por encima de la aguja y retirar despues la aguja

8) Verter la muestra lentamente por las paredes del tubo con anticoagulante. No olvidar colocar una gota en la lámina portaobjeto para realizar el frotis.

10.-Agitar el vial en círculos sobre la mesa para homogeneizar la muestra con el anticoagulante.

Resultados:

aqui podemos observar eritrocitos en donde algunos respresentan poiquilocitosis

aqui podemos observar un neutrofilo rodeado de varios eritrocitos que tambien algunos presentan poiquilocitosis

Observaciones:

En esta practica logre observar que realizar una puncion venosa es mas complicada que la puncion capilar ya puede tener mas riesgos, pero tambien mas ventajas ya que podemos realizar diversos analisis clinicos dependiendo si necesitamos suero o plasma

Conclusión:

Es muy importante saber realizar correctamente la tecnica de venopunción ya que depende de esta realizar algunos anlisis clinicos pero para ello debemos de no hemolizarla por que podemos dar falsos resultados o tener que volver a repetir la flebtomía, tambien orinetar al paciente si deve realizarse esto en ayunas ya que algunos analisis se realizan asi, como es el de glucosa, y saber tratar bien al paciente para que este se lleve una buena impresión del laboratorio y confie para que no se ponga nervioso al momento de hacerle la punción venosa

Bibliografía:
http://www.urgenciauc.com/duoc/Punciones_Venosas.pdf consultada el 4 de marzo del 2012

www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003423.htm  consultada el 4 de marzo del 2012





PUNCIÓN CAPILAR

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO Industrial y de Servicios No. 199

PRACTICA No. 1

“PUNCIÓN CAPILAR”

ALUMNA: MARISOL SEBASTIAN RENDON

“REALIZAR BIOMETRÍA HEMÁTICA”

4º DM LAB CLÍNICO

DR. VICENTE MARTÍNEZ FRAGOSO

objetivo:

tener el conocimeinto practico de saber realizar una puncion capilar correctamente en el laboratorio

Fundamento:

El sistema circulatorio esta conformado principalmente por vasos sanguineos que se dividen en tres tipos que son las venas, arterias y capilares y ahorita nos interesan los capilares sanguineos que son los vasos sanguineos de menor diametro, estan estructurados solo por una capa de tejido por lo que son muy delgados que se entrelazan formando redes entre las arterias y las venas.

Los tejidos capilares estan formados por una capa de celulas endoteliales que les permite ser muy permeables.

La punción capilar recoge la sangre capilar que llega de las arteriolas, vénulas y capilares, mediante una microherida, en la epidermis, practicada con una lanceta que nos permite tener una cantidad muy pequeña de sangre, esta la podemos realizar en algunas partes del cuerpo segun las caracteristicas de cada persona por ejemplo podria ser en la cara lateral del dedo medio o anular en los adultos, del lobulo de la oreja o en el dedo del pie gordo o talon en los niños

Material:

-pizeta

-algodon

-pipetas pasteur

-portaobjetos

-tubos capilares

-lancetas desechables esteriles

Reactivos:

-colorante de wright

- buffer de fosfato

Tecnica:

1) desinfectar con una torunda la area del dedo pulgar y frotar el dedo de abajo hacia arriba para acomular la sangre

2) Punzar la piel con la lanceta con un movimiento firme y rapido

3) primero se desecha la primera gota y despues se coloca una gota en un portaobjetos en la parte lateral 

4) luego se realiza el frotis para ello con otro portaobjetos se coloca por delante de la gota con un angulo de 30 a 45 grados y se empuja el portaobjetos a una velocidad constante hacia el otro extremo del otro portaobjetos donde se habia colocado la gota anteriormente

5) posteriormente se realiza la tincion de wrigth

6) por ultimo se realizan las respectivas observaciones en el microscopio

Observaciones:

En esta imagen podemos ver una abundante cantidad de eritrocitos y esta con el objetivo seco devil

ahora en esta imagen podemos ver mas claramente a los eritrocitos y se observa que algunos tienen poiqulocitosis, esta observacion esta realizada con el objetivo 100x

en el centro podemos identificar a un eutrofilo en donde se le distingue su nucleo, esta observacion esta con el objetivo 100X

Resultados:

observamos que las celulas que mas destacaron fueron los eitrocitos que se identifican por las caracteristicas de que tienen color rosa salmon con el centro mas palido, tambien identificamos un neutrofilo

CONCLUSIÓN

Esta practica es importante ya que ademas de aprenderla a realizarla, tambien logramos saber identificar algunas celulas diferenciandolas de unas a otras, asi como tambien saber en que ocasiones se debe practicar por ejemplo esta se puede hacer en los recien nacidos ya que no es posible realizar una puncion venosa, otro motivo podria ser cuando no se observan las venas, tambien por las condiciones del paciente que puede presentar quemaduras graves o por personas que tienen cancer y se les a realizado quimioterapia ademas de que tambien puede ser mas rapida y se obtiene con mas facilidad una ventaja de esta puede ser para los diabeticos para que chequen sus nivles de azucar aunque tiene sus riesgos como obtener flasos resultados debido al daño a las celulas sanguineas

Fuentes de consulta:

http://www.eccpn.aibarra.org/temario/seccion2/capitulo33/capitulo33.htm  fue consultado el dia 27 de febrero del 2012, www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003427.htm consultado el 27 de febrero del 2012